染雾生物催化剂不对称氧化反应研究综述 篇一
在有机合成领域，不对称氧化反应是一类重要的反应，可以有效地构建手性分子。而生物催化剂作为一种绿色、高效的催化剂，在不对称氧化反应中展现出了巨大的潜力。本文将对生物催化剂在不对称氧化反应中的应用进行综述。
首先，我们将介绍不对称氧化反应的基本原理。不对称氧化反应是指通过氧化反应引入手性中心，从而构建手性分子。该反应的关键步骤是氧化剂与底物的选择，以及催化剂对底物的选择性氧化。生物催化剂通过其特殊的催化机制，可以实现高效、高选择性的不对称氧化反应。
接下来，我们将重点介绍生物催化剂在不对称氧化反应中的应用。生物催化剂包括酶和细胞等，它们具有天然的手性选择性和底物特异性。我们将分别介绍不同类型的生物催化剂在不对称氧化反应中的应用案例。例如，脂肪酸氧化酶可以催化不对称氧化反应，制备含有手性酮的化合物。此外，还有一些特殊的生物催化剂，如金属酶和细胞色素P450等，它们在不对称氧化反应中也展现出了良好的催化性能。
最后，我们将总结生物催化剂在不对称氧化反应中的优势和挑战。生物催化剂具有高效、高选择性、环境友好等特点，因此在不对称氧化反应中具有广阔的应用前景。然而，生物催化剂的催化机制和催化活性仍然存在一些未知的问题，需要进一步研究和探索。
综上所述，生物催化剂在不对称氧化反应中的应用具有重要的意义。通过对生物催化剂的研究，我们可以进一步拓展不对称氧化反应的应用范围，并为有机合成领域的发展提供新的思路和方法。
生物催化剂不对称氧化反应研究综述 篇二
在有机合成领域，不对称氧化反应是一类重要的反应，可以有效地构建手性分子。而生物催化剂作为一种绿色、高效的催化剂，在不对称氧化反应中展现出了巨大的潜力。本文将从催化机制和应用角度，对生物催化剂在不对称氧化反应中的研究进行综述。
首先，我们将介绍生物催化剂在不对称氧化反应中的催化机制。生物催化剂可以通过酶催化和细胞催化两种方式实现不对称氧化反应。酶催化是指利用酶作为催化剂，通过其特殊的催化活性和手性选择性，实现对底物的高选择性氧化。细胞催化是指利用整个细胞作为催化剂，通过细胞内的酶系统和代谢途径，实现对底物的不对称氧化反应。
接下来，我们将重点介绍生物催化剂在不对称氧化反应中的应用案例。生物催化剂在不对称氧化反应中具有广泛的应用，可以用于制备手性酮、手性醇、手性酸等多种手性分子。我们将通过一些典型的案例，展示生物催化剂在不对称氧化反应中的催化效果和应用潜力。
最后，我们将分析生物催化剂在不对称氧化反应中面临的挑战和未来的发展方向。尽管生物催化剂在不对称氧化反应中具有许多优势，但其催化机制和催化活性仍然存在一些未知的问题。我们需要深入研究生物催化剂的催化机制，优化催化条件，提高催化效率和选择性。
综上所述，生物催化剂在不对称氧化反应中具有广阔的应用前景。通过对其催化机制和应用案例的综述，我们可以深入了解生物催化剂在不对称氧化反应中的研究进展，并为有机合成领域的发展提供新的思路和方法。
生物催化剂不对称氧化反应研究综述 篇三
生物催化剂不对称氧化反应研究综述
筛选获得高活性的氧化酶产生菌株一直是研究者发现和获取新酶的重要途径，下面是小编搜集整理的一篇探究生物催化剂不对称氧化反应的论文范文，欢迎阅读参考。
金属和有机小分子催化的硫醚的不对称氧化反应得到了长足的发展，而生物催化硫醚的不对称氧化由于环境友好、反应条件温和、反应体系较为简单等优点，近年来引起了研究人员的广泛关注[1].生物催化剂的来源主要有自然来源的微生物的筛选、纯酶和基因工程菌(Scheme1).本文综述了生物催化硫醚底物的不对称氧化反应的研究进展，重点介绍了微生物菌株整细胞、纯酶和基因工程菌等催化剂在硫醚底物的不对称氧化反应中的应用。
1、微生物催化剂
自然界存在丰富的微生物资源，筛选获得高活性的氧化酶产生菌株一直是研究者发现和获取新酶的重要途径，人们也从未停止去发现和挖掘源于自然的新型生物催化剂(表1).早在上世纪90年代，Holland课题组[2-5]就发现使用真菌Hel-minthosporiumspeciesNRRL4671和Mortierellaisa-bellina的整细胞为催化剂开展了一系列工作，实现了通过催化系列硫醚底物合成具有较高对映选择性的手性亚砜。他们[6]同时也发现真菌Beau-veriabassianaATCC7159能选择性的氧化L-型或者D-型的蛋氨酸成(SSSC或SSRC)的亚砜。后来他们[7]又发现了RhodococuserythropolisIGTS8用于芳香硫醚的不对称氧化反应。French和Gor-don等[8]预测了RhodococuserythropolisIGTS8催化硫醚底物结构与活性位点关系模型。
Kelly等[9]也发现Acinetobactersp.NCIMB9871,Pseudomonassp.9872,Xanthobacterau-totrophicusDSM431和BlackyeastNV-2等催化剂也能实现芳香硫醚的不对称氧化反应。后来，Collado课题组[10]发现了三株真菌，其中Botrytiscinerea显现出了S选择性，而Eutypalata和Tri-chodermaViride菌株则具有相反的选择性，获得R构型的手性亚砜。
近年来，许建和课题组[11]从上海、山东和江苏等地煤的气化站采集的土壤中分离获得了对映选择性互补的微生物菌种库，其中单加氧酶产生菌株Rhodococcussp.StrainECU0066能有效的催化系列硫醚底物的不对称氧化反应，获得14%~86%的产率和38%~99%ee值的手性亚砜类化合物，他们并研究了该反应的机理，该反应是通过氧化-氧化拆分二步来实现，底物浓度能达到10mmol·L-1.为了进一步提高反应的催化效率，他们[12]建立了水-异辛烷双相反应体系，在2.4L的生物反应器中可以实现底物浓度为150mmol·L-1的苯甲硫醚的生物氧化反应，产率为49%,对映选择性达到99%.采用水-正辛烷两相反应体系，以Rhodococcussp.CCZU10-1为催化剂，也可以获得S构型的苯甲亚砜，底物浓度可达到55.3mmol·L-1,产物的ee值达到99%[13].由于他们发现单加氧酶产生菌株Rhodococcussp.StrainECU0066催化苯甲硫醚的反应是通过氧化-氧化拆分来进行的，他们[14]探索了采用消旋化的亚砜为底物，研究其不对称氧化拆分反应，在较短的反应时间内仍然可以催化消旋化亚砜底物的不对称氧化拆分，获得较高的对映选择性。
与此同时，Elkin课题组[15]发现了一些能完全转化硫醚为手性亚砜的生物酶催化剂，Gor-doniaterraeIEGM136和RhodococcusIEGM66能有效的催化系列芳香硫醚为相应的高光学活性的亚砜，其ee值分别达到89%和95%.本课题组[16]也从河床的淤泥中发现一株假单胞菌Pseudo-monasmonteiliiCCTCCM2013683,能有效催化苯甲硫醚的不对称氧化反应，底物浓度在30mmol·L-1的情况下，仍然可以获得99%的产率和99%的ee值，但是当芳香环上具有不同的取代基时，反应的活性和对映选择性均受较大影响。
对于芳香硫醚底物的直接氧化，可以直接将一些手性亚砜类药物的前体硫醚作为底物，通过生物催化氧化，实现一步氧化直接合成目标亚砜药物(Chart1).比如Nagasawa等[17]通过筛选获得菌株CunninghamellaechinulataMK40,其整细胞可以直接催化雷贝拉唑前体硫醚的氧化，可获得ee值达到99%的S构型的雷贝拉唑。Kyslík等[18]筛选获得菌株Lysinibacillussp.B71,几乎可以得到对映纯的埃索美拉唑。
2、纯酶催化剂
生物催化硫醚不对称氧化反应所使用的纯酶催化剂主要有超氧化物酶、单加氧酶及其他酶等。
1995年，Holland小组从AcinetobacterNCIB9871菌株中发现了依赖于NADPH的环己酮单加氧酶催化系列芳香硫醚的不对称氧化反应，硫醚的底物结构对催化活性和对映选择性均具有较大影响，比如烷基侧链连接Cl,CN,CH=CH2和OH等基团时，催化效率很低。他们后来构建了葡萄糖脱氢酶和环己酮单加氧酶的循环体系，促进辅酶循环再生，转化率得到提升，同时副产物砜减少[19].Baeyer-Villiger单加氧酶可以催化硫醚、二噻烷和消旋化亚砜的对映选择性氧化，苯乙酮单加氧酶和4-羟基苯乙酮单加氧酶可以催化芳香硫醚的氧化，后来4-羟基苯乙酮单加氧酶的变种显现出了更广的底物范围[20].Gotor等[21]采用苯乙酮单加氧酶和4-羟基苯乙酮单加氧酶研究了杂环类硫醚的不对称氧化反应，大多数底物均获得了25%~99%的ee值。
超氧化物酶是一类重要氧化还原酶，在生物氧化反应中有较多的应用，比如可以催化硫醚、烯烃或者C-H键的氧化反应[22].Hager等[23]首次将氯过氧化物酶从真菌Calda
Wever等[26]在用来源于Ascophyllumnodosum的钒溴超氧化物酶催化芳香硫醚的氧化时发现芳香环上连有吸电子基团的硫醚作为反应底物时，反应活性急剧下降，而当吸电子基团为NO2或CN时，反应甚至不能发生。此外，该酶还可以催化非芳香的环状硫醚的不对称氧化拆分，获得相应的亚砜。
3、基因工程菌催化剂现代分子生物学技术的发展
为高效基因工程菌催化剂的构建提供了可能，同时还可以通过改造酶和进化酶获得高活性和选择性的催化剂。许建和课题组[27]通过P450单加氧酶和葡萄糖脱氢酶的共表达，构建的重组工程菌能有效实现对氯苯甲硫醚的'氧化，底物浓度可达2mmol·L-1~5mmol·L-1.陈振明等[28]将来源于Acinetobatercalcoaceticus的环己酮单加氧酶基因与来源于Candidaboidinii的醇脱氢酶基因在大肠杆菌中共表达，在底物浓度达20mmol·L-1的情况下，产物ee值达99%.Bornscheuer等[29]从PseudomonasputidaJD1中发现4-羟基苯乙酮单加氧酶也能有效催化苯甲硫醚的不对称氧化。源于Stenotroph-omonasmaltophilia的黄素单加氧酶可以采用NADPH或者NADH为辅酶的单加氧酶，Grogan课题组[30]突变单加氧酶sMFO时，将52-位的苯b胺酸替换为缬氨酸时，得到Phe52Val突变体，其催化系列硫醚合成7%~41%ee的S构型的亚砜产物，而采用未突变的单加氧酶sMFO催化反应时，获得19%~80%ee且构型为R的亚砜。
Fishman等[31]以甲苯单加氧酶为研究目标，通过突变V106的缬氨酸和I100的亮氨酸，其反应速率和对映选择性均得到了较大提高。后来他们又通过饱和突变的方法对硝基苯双加氧酶207位残基进行突变，获得突变体V207I和V207A,在催化苯甲硫醚的反应时显示出了不同的对映选择性，并认为硫醚底物与对硝基苯双加氧酶之间的活性位点可能与疏水相互作用和空间位阻有关，从而相应的影响活性与对映选择性。Li课题组[32]采用P450pyrI83H与葡萄糖脱氢酶进行共表达，在磷酸缓冲溶液和离子液体[P6,6,614][Ntf2]的双相反应体系中，离子液体对底物和酶显示出了较好的溶解性和生物相容性，在催化反应的过程中，底物浓度和对映选择性均得到了不同程度提高。
4、结论与展望
生物催化硫醚的不对称氧化反应近年来取得了较大的突破和进展，但是同生物催化还原和水解等反应相比较，硫醚底物浓度低仍然是研究过程中最关键的瓶颈。与此同时，如何抑制过度氧化产物砜的形成也是未来研究的重点，其核心是要发现和改造高活性和高对映选择性的催化剂。
野生菌株的筛选是获得具有高底物浓度和高选择性的生物催化剂的常规方法之一。随着现代分子生物学技术的发展，如何通过基因组数据库挖掘高活性和高选择性的硫醚氧化酶基因将成为研究的重点，并结合定向进化和半理性设计等人工改造的方式，去寻找和发现高活性的硫醚氧化酶。
此外，构建辅酶循环再生系统、酶的固定化、反应介质体系以及生物酶反应器的设计和综合考虑，对实现硫醚底物的高效不对称氧化反应的潜在的过程化和工业化的研究均具有重要意义。
